PROGRAMMA
1° Lezione
Prima Parte
- Lezione teorico-pratica in laboratorio sulle tecniche di coltivazione delle cellule in sterilità, conte cellulari e discriminazione cellule vitali e necrotiche. Esercitazione.
Seconda Parte
- Esercitazione in laboratorio. Preparazione gel di acrilammide per SDS-PAGE. Preparazione tamponi di corsa. Preparazione di omogenati cellulari e dosaggio proteico. Denaturazione campioni.
2° Lezione
Prima Parte
- Esercitazione in laboratorio. Caricamento campioni su SDS-PAGE, corsa elettroforetica. Lezione teorica su Western (immuno-) blotting. Esercitazione: trasferimento su nitrocellulosa.
Seconda Parte
- Esercitazione in laboratorio. Tecnica dell’immunofluorescenza. Tecniche di imaging in cellule vitali. Preparazione dei vetrini da microscopia. Piastramento delle cellule su vetrino per imaging in fluorescenza. Uso del microscopio a fluorescenza. Software per Imaging.
Terza Lezione
Prima Parte
- Esercitazione in laboratorio. Sviluppo immunoblotting e analisi densitometrica delle bande.
- Incubazione cellule per trattamenti citotossici con farmaci chemioterapici e pro-ossidanti.
Seconda Parte
- Esercitazione in laboratorio. Utilizzo sonde fluorescenti per analisi dello stress ossidativo e della morte cellulare per necrosi. Sonde fluorescenti per cellule vitali. Sonde fluorescenti per stress ossidativo mitocondriale e citoplasmatico. Osservazioni al microscopio a fluorescenza.
Quarta Lezione
Prima Parte
- Esercitazione in laboratorio. Lezione su autofagia e tecniche di analisi con GFP-LC3. Esercitazione. Tecniche di trasfezione plasmidiale.
Seconda Parte
- Esercitazione in laboratorio. Osservazioni al microscopio a fluorescenza. Analisi dell’autofagia con GFP-LC3. Immunofluorescenza.
Quinta Lezione
Prima Parte
- Introduzione alla citofluorimetria. Principi teorici. Analisi del ciclo cellulare.
Seconda Parte
- Analisi al citofluorimetro della morte cellulare: discriminazione apoptosi e necrosi con AnnessinaV-FITC e Ioduro di Propidio.
Materiale Didattico
Il materiale didattico verrà fornito dal docente durante le lezioni. Inoltre, lo studente deve possedere le conoscenze di base di Biologia Cellulare e Molecolare e di Patologia Generale.
Avvisi:
Il corso di LABORATORIO DI PATOLOGIA CELLULARE E MOLECOLARE si svolge a Novara, presso il Laboratorio del Docente a Palazzo Bellini, in Via Paolo Solaroli 17, Dipartimento di Scienze della Salute.
Il corso dura complessivamente 48 ore e si svolge nell'arco di una settimana "full-immersion".
Le lezioni teorico-pratiche si svolgono dalle ore 08.00 alle 19.00, ad eccezione del primo giorno con inizio alle ore 08.30. Il programma del corso è pubblicato sul sito UPO e su questo sito.
L'iscrizione al corso è obbligatoria. Inviare email al docente un mese prima dell'inizio delle lezioni.
Obbligatorio l'uso del camice bianco; capelli lunghi legati dietro la schiena o raccolti; informare se allergici ai guanti di lattice.
Al termine del corso, è possibile (facoltativo) sostenere il test scritto e il colloquio orale con validità di esame (che sarà registrato al primo appello utile, previa iscrizione come da regolamento).
PS: Per informazioni NON presenti sul sito UPO e su questa pagina, contattare il docente via email.
